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      請教生意經:如何制造羧甲基纖維素鈉?

      返回列表 來源:未知 瀏覽:1825 發布日期:2018-04-21 14:22:55【
        采購羧甲基纖維素鈉,選擇懷化奧晟科技有限公司,本公司28年專業只生產CMC,因為專業所以卓越,目前與多家上市公司有深度合作,期待您的咨詢和洽談,今天是二零一八年四月二十一日,今日的問答內容是《請教生意經:如何制造羧甲基纖維素鈉?》。
        問題補充:
        最佳答案:博凌科為解答:一、試劑準備1、新鮮配制冷的 RIPA 裂解緩沖液:150 mM NaCL1% NP-40 (去垢劑) 0.1% SDS (去垢劑)2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制劑) (使用前加入)2ug/ml Leupeptin (蛋白酶抑制劑) (使用前加入)1 mM PMSF (蛋白酶抑制劑)1.5 mM EDTA (蛋白酶抑制劑)1mM NaVanadate (磷酸脂酶抑制劑)(任選)以上所有試劑均按比例溶于150 mM NaCL溶液中。2、冷的PBS 中加入 1 mM PMSF1.5 mM EDTA1mM NaVanadate (釩酸鈉)(任選)3、對數期生長狀態佳的細胞,75cm至少3-4瓶(90%以上生長面積)。二、實驗步驟1、將長滿細胞的培養瓶放置在冰上, 用吸液管吸出培養液。加入足夠的冷的 PBS在培養瓶中充分洗滌細胞表面,以洗去瓶中殘留的培養基,倒掉PBS ,重復以上操作2-3遍。在最后一次洗滌中盡可能吸干殘留的PBS,盡量在冰上操作。2、 向培養瓶中加入冷的RIPA 裂解緩沖液 (每75cm2 培養瓶加1ml). 然后用細胞刮子沿著瓶壁開始刮細胞,如果所需要刮的同種細胞有多瓶,則將第一瓶刮下的細胞液吸出轉入下一瓶中繼續刮 (由于處理后的細胞裂解液較粘稠,所以宜用直徑大點的吸液管吸取)。3、 吸出刮好的細胞裂解液置于14ml 離心管中 (置于冰上),然后重復步驟2以刮取剩下的細胞。4、 盡可能將多的細胞裂解液收集到14ml的離心管中,樣品插入冰盒進行超聲,超聲強度以不產生泡沫為準,超聲每次2-3秒,重復3-4次。如仍有細胞碎片或沉淀,應離心10000rpm,10分鐘,留取上清。5、 取出小量細胞裂解液測其蛋白濃度(用Biorad Bradford 試劑盒或紫外分光光度計,在A280測定),分裝保存在 -70℃。
        歡迎光臨懷化市奧晟科技有限公司官網,今天為大家分享的文章是《請教生意經:如何制造羧甲基纖維素鈉?》,本文發表于二零一八年四月二十一日,責任編輯莊周小夢,聯系QQ:425953616,電話18607482885,如果有侵犯您版權的地方請及時通知,我們將在第一時間刪除。
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